可見(jiàn)分光光度計(jì)有些廠家的721和722外觀上根本看不出來(lái)有啥區(qū)別，當(dāng)然硬件和軟件上是有區(qū)別。分光光度計(jì)作為一種理化分析儀器，廣泛應(yīng)用于工廠、礦山、醫(yī)院以及科研單位的化驗(yàn)室，可在光譜區(qū)域360～800nm內(nèi)對(duì)樣品進(jìn)行定性定量的分析。下面以最常見(jiàn)的721型可見(jiàn)分光光度計(jì)為例，分析它的常見(jiàn)故障與維修。1、光路無(wú)光或能量檔顯示不到1 00％ (其余部分正常) 該現(xiàn)象說(shuō)明儀器電路無(wú)故障，只是光路系統(tǒng)需要調(diào)整。將波長(zhǎng)盤轉(zhuǎn)到580nm 處，應(yīng)有一明顯、完整的長(zhǎng)方形黃色光斑，若沒(méi)有或很模糊，應(yīng)對(duì)光路進(jìn)行調(diào)整。首先，按單色器入射狹縫高度，調(diào)整好光源燈高度，然后左右調(diào)整反射鏡位置，使反射光進(jìn)人人射狹縫。固定好反射鏡后，繼續(xù)調(diào)整反射鏡背部螺絲，使進(jìn)入單色器入射狹縫的光強(qiáng)為最大。2．開(kāi)機(jī)后光源燈不亮應(yīng)先檢查燈電壓和光源燈的 “通、斷”情況。光度計(jì)光源燈燒毀的現(xiàn)象較少，可能燈電壓沒(méi)有加上，此時(shí)應(yīng)檢查燈電源穩(wěn)壓部分。在燈穩(wěn)壓電路中，集成運(yùn)放F004A為核心元件，在運(yùn)放外圍元件完好的情況下，調(diào)整運(yùn)放的輸入端電位器 W1，在輸出端應(yīng)有一電壓變化，若沒(méi)有，說(shuō)明運(yùn)算放大器損壞。然后，再檢查功率放大管，若還沒(méi)有解決，應(yīng)向前檢查整流塊，否則，就是變壓器故障。
3、旋轉(zhuǎn)100％，光源燈亮度變化不大 (其余部分正常) ‘ 該現(xiàn)象也屬于整機(jī)調(diào)整，儀器面板上100％旋鈕均為細(xì)調(diào)，W1為粗調(diào)。將儀器零點(diǎn)調(diào)整好后，將面板上 100％旋鈕調(diào)到最大，用萬(wàn)用表測(cè)量燈電壓，旋轉(zhuǎn)機(jī)內(nèi)粗條電位器。當(dāng)萬(wàn)用表顯示的燈電壓為最大時(shí)，停止調(diào)整，此現(xiàn)象即消失。4、波長(zhǎng)超差波長(zhǎng)誤差在檢定結(jié)果上可分為兩種情況：第一種情況為，誤差方向一致，并呈線性，可通過(guò)轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)度盤消減波長(zhǎng)誤差。第二情況為，誤差方向不一致，有正差有負(fù)差。誤差的變化可提示一個(gè)使誤差呈線性的調(diào)整方向，光度計(jì)然后轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)度盤消除線性誤差，依然超差的部分，再通過(guò)調(diào)節(jié)準(zhǔn)直螺釘，使波長(zhǎng)誤差方向一致并呈線性，再配合移動(dòng)波長(zhǎng)度盤，使誤差調(diào)到最小，如此反復(fù)調(diào)整。對(duì)于第二種情況波長(zhǎng)誤差的調(diào)整方法通常為：使用干涉濾光片的標(biāo)準(zhǔn)峰值波長(zhǎng)為438．2rim、553．5nm、638．5nm，調(diào)整準(zhǔn)直鏡，使580nm處樣品室為黃光，測(cè)得峰值波長(zhǎng)為420nm、550nm、640nm，最大最小峰值差為640nm-420nm=220nm，標(biāo)準(zhǔn)鋒值差 638．5nm-438．2nm=200．3nm，調(diào)準(zhǔn)直鏡使紅片峰值在650nm，測(cè)紫片為422nm，峰值差為228nm，說(shuō)明調(diào)整方向不對(duì)，再用紅片調(diào)整準(zhǔn)直鏡~q628nm，測(cè)紫片為423nm，峰值差為205nm，接近于標(biāo)準(zhǔn)峰值差，此時(shí)，逆時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)度盤，由423nm至438nm，測(cè)得峰值為436nm、558nm、642nm，此時(shí)誤差在合格范圍內(nèi)。另外，如果用標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)為466．2nm、554．Onm、676．3nm的干涉濾光片測(cè)得 721分光光度計(jì)的波長(zhǎng)為476nm、554nm、664nm，最大最小峰值差為 188nm，而標(biāo)準(zhǔn)峰值差為210．1nm，需要擴(kuò)展。用紅片調(diào)至686nm，測(cè)另兩片為567nm、483nm。此時(shí)順時(shí)針轉(zhuǎn)動(dòng)波長(zhǎng)度盤 1 9nm，測(cè)得值為474nm、557nm、679nm，再順時(shí)針轉(zhuǎn) 4nm，測(cè)得值為 467nm、550nm、672nm，誤差合格。由此可見(jiàn)，光度計(jì)通過(guò)觀察所測(cè)數(shù)據(jù)的變化，可使儀器的狀態(tài)逐步得到改善，直至合格。一般情況下，當(dāng)儀器波長(zhǎng)范圍需要擴(kuò)展時(shí) (即實(shí)測(cè)儀器兩端的波長(zhǎng)差小于標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)差)，可調(diào)準(zhǔn)直鏡螺絲，使峰值波長(zhǎng)測(cè)得值高于標(biāo)準(zhǔn)值波長(zhǎng)，然后順時(shí)針移動(dòng)波長(zhǎng)度盤，若儀器波長(zhǎng)需要縮小時(shí) (即實(shí)測(cè)儀器兩端的波長(zhǎng)差大于標(biāo)準(zhǔn)波長(zhǎng)差)，可調(diào)整準(zhǔn)直鏡螺絲，使峰值波長(zhǎng)測(cè)得值低于標(biāo)準(zhǔn)值波長(zhǎng)，然后逆時(shí)針移動(dòng)波長(zhǎng)度盤，通過(guò)這種反復(fù)細(xì)致的調(diào)整，可是儀器處于良好狀態(tài)。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)可用于物質(zhì)的定量分析、結(jié)構(gòu)分析和定量分析。而且還能測(cè)定某些化合物的物理化學(xué)參數(shù)，如摩爾質(zhì)量、配合物的配合比例和穩(wěn)定常熟、酸堿電離常數(shù)等。紫外可見(jiàn)吸收光譜是物質(zhì)中分子吸收200-800nm光譜區(qū)內(nèi)的光而產(chǎn)生的。這種分子吸收光譜產(chǎn)生于價(jià)電子和分子軌道上的電子在電子能級(jí)躍遷(原子或分子中的電子，總是處在某一種運(yùn)動(dòng)狀態(tài)之中。每一種狀態(tài)都具有一定的能量，屬于一定的能級(jí)。這些電子由于各種原因(如受光、熱、電的激發(fā))而從一個(gè)能級(jí)轉(zhuǎn)到另一個(gè)能級(jí)，稱為躍遷。)當(dāng)這些電子吸收了外來(lái)輻射的能量就從一個(gè)能量較低的能級(jí)躍遷到一個(gè)能量較高的能級(jí)。因此，每一躍遷都對(duì)應(yīng)著吸收一定的能量輻射?？梢?jiàn)分光光度計(jì)具有不同分子結(jié)構(gòu)的各種物質(zhì)，有對(duì)電磁輻射顯示選擇吸收的特性。吸光光度法就是基于這種物質(zhì)對(duì)電磁輻射的選擇性吸收的特性而建立起來(lái)的，它屬于分子吸收光譜。吸光光度法也稱做分光光度法，即儀器進(jìn)行分光并用光度法測(cè)定，這類儀器包括了分光光度計(jì)與原子吸收光譜儀。吸光光度法的本質(zhì)是光的吸收，因此稱吸光光度法比較合理，當(dāng)然，稱分子吸光光度法是最確切的緊外可見(jiàn)分光光度計(jì)法對(duì)無(wú)機(jī)元素的定性分析應(yīng)用較少，無(wú)機(jī)元素的定性分析可用原子發(fā)射光譜法或化學(xué)分析的方法。在有機(jī)化合物的定性鑒定和結(jié)構(gòu)分析中，由于紫外可見(jiàn)光譜較簡(jiǎn)單，特征性不強(qiáng)，因此該法的應(yīng)用也有一定的局限性。但是它適用于光度計(jì)不飽和有機(jī)化合物。尤其是共軛體系的鑒定，以此推斷未知物的骨架結(jié)構(gòu)。此外，可配合紅外光譜、核磁共振波譜法和質(zhì)譜法進(jìn)行定性鑒定和結(jié)構(gòu)分析，因此它仍不失為是一種有用的輔助方法。一般有兩種定性分析方法，比較吸收光譜曲線和用經(jīng)驗(yàn)規(guī)則計(jì)算最大吸收波長(zhǎng)λmax，然后與實(shí)測(cè)值進(jìn)行比較?？梢?jiàn)分光光度計(jì)紫外可見(jiàn)分光光度定量分析的依據(jù)是Lambert-Beer定律，即在一定波長(zhǎng)處被測(cè)定物質(zhì)的吸光度與它的溶度呈線性關(guān)系。應(yīng)此，通過(guò)測(cè)定溶液對(duì)一定波長(zhǎng)入射光的吸光度可求出該物質(zhì)在溶液中的濃度和含量。種常用的測(cè)定方法有：?jiǎn)谓M分定量法、多組分定量法、雙波長(zhǎng)法、示差分光光度法和導(dǎo)數(shù)光譜法等。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的類型很多，可見(jiàn)分光光度計(jì)但可歸納為三種類型：?jiǎn)喂馐止夤舛扔?jì)、雙光束分光光度計(jì)和雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)。單光束分光光度計(jì)，經(jīng)單色器分光后的一束平行光，輪流通過(guò)參比溶液和樣品溶掖，以進(jìn)行吸光度的測(cè)定。這種類型的分光光度計(jì)結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，操作方便，維修容易，適用于常規(guī)分析；雙光束分光光度計(jì)，經(jīng)單色器分光后經(jīng)反射鏡(M1)分解為弧度相等的兩束光，一束通過(guò)參比池，另一束通過(guò)樣品池。光度計(jì)能自動(dòng)比較兩束光的強(qiáng)度，此比值即為試樣的透射比，經(jīng)對(duì)數(shù)變換將它轉(zhuǎn)換成吸光度并作為波長(zhǎng)的函數(shù)記錄下來(lái)。雙光束分光光度計(jì)一般都能自動(dòng)記錄吸收光譜曲線。由于兩束光同時(shí)分別通過(guò)參比池和樣品他，還能自動(dòng)消除光源強(qiáng)度變化所引起的誤差；雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)，光度計(jì)由同一光源發(fā)出的光被分成兩束，分別經(jīng)過(guò)兩個(gè)單色器，得到兩束不同波長(zhǎng)的單色光;再利用切光器使兩束光以一定的頻率交替照射同一吸收池，然后經(jīng)過(guò)光電倍增管和電子控制系統(tǒng)，最后由顯示器顯示出兩個(gè)波長(zhǎng)處的吸光度差值ΔA(ΔA=A1-A2)?？梢?jiàn)分光光度計(jì)雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)的優(yōu)點(diǎn)：對(duì)于多組分混合物、混濁試樣(如生物組織液)的分析，以及存在背景于擾或共存組分吸收干擾的情況下，利用雙波長(zhǎng)分光光度法，往往能提高方法的靈敏度和選擇性。利用雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)，能獲得導(dǎo)數(shù)光譜。通過(guò)光學(xué)系統(tǒng)轉(zhuǎn)換，使雙波長(zhǎng)分光光度計(jì)能很方便地轉(zhuǎn)化為單波長(zhǎng)工作方式。如果能在光度計(jì)兩波長(zhǎng)處分別記錄吸光度隨時(shí)間變化的曲線，還能進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)動(dòng)力學(xué)研究?？梢?jiàn)分光光度計(jì)就是利用分光光度法對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量定性分析的儀器。 通過(guò)測(cè)定被測(cè)物質(zhì)在特定波長(zhǎng)處或一定波長(zhǎng)范圍內(nèi)光的吸收度，對(duì)該物質(zhì)進(jìn)行定性和定量分析。 常用的波長(zhǎng)范圍為：(1)200～400nm的紫外光區(qū),(2)400～760nm的可見(jiàn)光區(qū),(3)2.5～25μm（按波數(shù)計(jì)為4000cm<-1>～400cm<-1>）的紅外光區(qū)。所用儀器為紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、可見(jiàn)光分光光度計(jì)（或比色計(jì)）、紅外分光光度計(jì)或原子吸收分光光度計(jì)。紫外可見(jiàn)分光可見(jiàn)分光光度計(jì)光度計(jì)測(cè)的是分子在紫外光區(qū)的吸收強(qiáng)度，紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)可用于大部分有色物質(zhì)的定量監(jiān)測(cè)，通常需要使用各種各樣的顯色劑。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的常用參數(shù)：光度計(jì)紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的吸光度范圍：-0.301-1.999A紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)范圍：200-1000nm 濃度顯示范圍：0-1999波長(zhǎng)準(zhǔn)確度：±2nm 雜散光：≤0.5%T@220nm、360nm波長(zhǎng)重復(fù)性：1nm 穩(wěn)定性：±0.003A/小時(shí)光譜帶寬：4nm 配有RS232通訊接口透射比準(zhǔn)確度：±0.5%T 打印機(jī)：支持透射比重復(fù)性：0.2%T 應(yīng)用軟件：支持可見(jiàn)分光光度計(jì)透射比范圍：0.0-125%T 光度計(jì)的分類很多，包括了可見(jiàn)分光光度計(jì)、紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、雙束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)、智能可見(jiàn)分光光度計(jì)等。光度計(jì)智能可見(jiàn)分光光度計(jì)比較智能，用途也比較廣，它的主要功能特點(diǎn)有：●智能可見(jiàn)分光光度計(jì)廣泛應(yīng)用于冶金、機(jī)械、化工、醫(yī)療衛(wèi)生、臨床檢驗(yàn)、生物化學(xué)、環(huán)境保護(hù)、食品、●單片機(jī)控制程序運(yùn)行及數(shù)據(jù)處理；●高精度全息平面光柵分光，零點(diǎn)、滿程自動(dòng)調(diào)整；●數(shù)顯直讀、打印質(zhì)量分?jǐn)?shù)，T、A、C任意切換；●智能可見(jiàn)分光光度計(jì)可存儲(chǔ)20條工作曲線，具有斷電保護(hù)功能。智能可見(jiàn)分光度計(jì)的常用參數(shù)：●智能可見(jiàn)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)范圍： 330～830nm ；●智能可見(jiàn)分光光度計(jì)的波長(zhǎng)準(zhǔn)確度： ±2nm ；●波長(zhǎng)重復(fù)性： 1nm； ●智能可見(jiàn)分光光度計(jì)的光譜帶寬： 6nm；●透射比準(zhǔn)確度：±0.5%T（在546.1nm處）；●雜散光：優(yōu)于1.0%T（在360nm處）；●可見(jiàn)分光光度計(jì)智能可見(jiàn)分光光度計(jì)的測(cè)量范圍： 透射比0-100%T 吸光度 0～1.999A 濃度 0～9999單位。光度計(jì)主要是用來(lái)測(cè)量不同波長(zhǎng)的光譜，從而對(duì)物質(zhì)進(jìn)行定量分析。西安紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)是對(duì)波長(zhǎng)在紫外光區(qū)里波長(zhǎng)的測(cè)量，測(cè)量的原理是，物質(zhì)的吸收光譜本質(zhì)上就是物質(zhì)中的分子和原子吸收了入射光中的某些特定波長(zhǎng)的光能量， 相應(yīng)地發(fā)生了分子振動(dòng)能級(jí)躍遷和電子能級(jí)躍遷的結(jié)果。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子 、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同，因此，每種物質(zhì)就有特有的、固定的吸收光譜曲線，可見(jiàn)分光光度計(jì)可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的應(yīng)用波長(zhǎng)范圍為200～400nm的紫外光區(qū)、400～850nm的可見(jiàn)光區(qū)。
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